bc1-2基因siRNA-2提高急性原代白血病细胞对阿糖胞苷敏感性

目的研究以bcl-2基因为靶标有效siRNA-2(small interference RNA)能否提高急性原代白血病细胞对阿糖胞苷(Ara-C)敏感性.方法将siRNA转入原代白血病细胞并与Ara-C联合培养,于24、48、72 h,用锥虫蓝拒染法计数活细胞,用免疫细胞化学技术检测原代白血病细胞bcl-2和p53蛋白的表达.结果siRNA-2(1μmol/L)与Araa-C组(0.2 μmol/L)联合作用,在72 h内能显著降低原代白血病细胞存活,细胞数从3×108/L下降到1.2×108/L;显著抑制bcl-2和p53蛋白的表达,与对照组相比bcl-2蛋白表达率下降18.46%;p53蛋白表达率下降14.56%.结论siRNA-2能提高原代白血病细胞对阿糖胞苷敏感性.     

二氢杨梅素对糖耐量异常大鼠氧化和非酶糖基化的影响

目的:研究二氢杨梅素对糖耐量异常大鼠氧化和非酶糖基化的影响。方法: 以D-半乳糖为诱导剂，采用剂量递增全程腹腔注射法建立糖耐量异常动物模型。以二氢杨梅素为受试物，二甲双胍降糖药为阳性对照，实验8周后，测定各实验组大鼠空腹及餐后2 h血糖、血清胰岛素水平、血清超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量、血清糖化血红蛋白（GHb）和晚期糖基化终末产物（AGEs）含量。结果: 与模型组比较，二氢杨梅素组餐后2 h血糖、血清胰岛素水平及胰岛素抵抗指数显著降低(P<0.05)，血清GSH-Px活性明显增高（P<0.05），血清MDA含量及AGEs水平显著降低(P<0.05)，各组大鼠血清GHb含量和SOD活性差异无显著性(P>0.05)。结论: 二氢杨梅素可通过提高机体GSH-Px抗氧化酶活性及抑制非酶糖基化作用，降低机体氧化应激水平和胰岛素抗性，促进外周组织对血糖的利用，从而明显改善大鼠糖耐量异常状态。     

B-ALL患者胸腺输出TCR Vβ亚家族naïve T细胞分析

目的 了解B细胞-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血T细胞中TCR Vβ亚家族23种信号T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)的存在情况,从而了解胸腺近期输出各TCR Vβ亚家族na(i)veT细胞的功能.方法 利用半巢式PCR分别扩增10例B-ALL患者外周血单个核细胞DNA中的23种Vβ～Dβ1sjTRECs,10例正常人作为对照.结果 TCR Vβ亚家族sjTRECs在大部分正常人和部分B-ALL患者中均可检测到,与正常人比较,B-ALL病人的Vβ24～Dβ1sjTRECs出现频率比正常人高,且有统计学意义(80%30%,P=0.0285),另有18个家族的Vβ～Dβ1sjTRECs比正常人低,其中在Vβ1(30%,P=0.0285)、Vβ12(20%,P=0.0285)、Vβ13(40%,P=0.0043)、Vβ15(20%,P=0.0022)和Vβ18(20%,P=0.0089)5个亚家族sjTRECs出现频率的差异有统计学意义.结论 B-ALL病人胸腺输出大多数Vβ亚家族na(i)veT细胞功能低于正常人.     

疏肝健脾方药对LXRα/FAS信号通路介导非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞脂肪沉积的影响

目的探讨疏肝健脾方药对LXRα/FAS信号通路介导非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝细胞脂肪沉积的影响。方法选用SPF级雄性SD大鼠75只,共分5组,每组15只,分别为:正常组,模型组,疏肝组,健脾组及合方组;除正常组,其余均各组采用高脂饮食复制NAFLD大鼠模型,给药各组分别给予疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)、合方(柴胡疏肝散和参苓白术散合方)进行干预,采用全自动生化分析肝脂改变,分离出肝细胞,Typan blue染色和流式细胞术(FCM)对肝细胞的活性及纯度进行鉴定。采用实时定量PCR法检测肝细胞LXRαmRNA、FAS mRNA的表达,采用Western blot法检测LXRα、FAS蛋白在肝细胞中的表达。结果 (1)油红O染色后模型组的NAFLD大鼠病理结构显示肝细胞肿胀,细胞核位于细胞边缘,细胞浆内可见大小不等的小空泡,部分肝细胞小空泡融合成大泡等特征性改变,提示成功建立高脂饮食诱导NAFLD大鼠实验动物模型。各组中药对NAFLD病理结构改变均有不同程度的修复作用,尤以疏肝组明显。(2)与正常组比较,模型组肝细胞LXRα、FAS基因及蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,健脾方和疏肝方组的表达水平下调明显(P<0.01,P<0.05)。结论 LXRα/FAS通路是介导NAFLD脂质平衡代谢紊乱重要的信号通路,疏肝健脾方药能够调控肝细胞LXRα/FAS通路使NAFLD大鼠肝细胞脂肪沉积趋于恢复,这可能是疏肝健脾方药抗实验性大鼠脂肪肝的作用机制之一。     

异常与正常中医体质鼻咽癌及其高危人群淋巴细胞DNA损伤特点研究

目的 探讨异常与正常中医体质鼻咽癌及鼻咽癌高危人群淋巴细胞DNA损伤特点。方法 采用单细胞凝胶电泳实验技术检测健康人群28名、鼻咽癌高危人群27例及鼻咽癌初诊患者13例外周血淋巴细胞DNA损伤情况,并检测3组人群中正常体质者及异常中医体质者各自的DNA损伤情况,以彗星尾长、尾矩、尾DNA百分比含量为DNA损伤指标。结果 鼻咽癌患者彗星尾长、尾矩、尾DNA百分比含量分别为：（35.77±4.22） μm、（8.10±1.63） μm、（57.48±4.63）%;鼻咽癌高危人群分别为（15.25±4.15） μm、（5.01±1.92） μm、（31.99±4.11）%;健康人分别为（14.31±3.64） μm、（4.37±1.80） μm、（29.89±3.15）%;鼻咽癌患者与高危人群及健康人比较此3项指标差异均有统计学意义（P<0.05）。健康人群、鼻咽癌高危人群及鼻咽癌患者3组人群,其异常中医体质者相对于正常体质者存在着更多的DNA损伤情况（P<0.05）。结论 鼻咽癌患者存在着明显遗传物质不稳定性,表现为淋巴细胞的DNA损伤严重。健康人群、鼻咽癌高危人群及鼻咽癌患者3组人群,具有异常中医体质者DNA损伤高于正常中医体质者。     

不同等级医院科研工作的战略决策与规则

在科技日益发展的今天,我国的科学研究取得了显著的成绩,使大家开展科研的积极性越来越高涨。特别是科技工作的指标作为衡量一个医院的水平,并且是评选等级的重要指标后,一些医院根据现阶段医院分级管理的特点和各级医院质量评估的要求,大力开展科研,使科研呈雨后春笋般的凸现,这种现象是喜是忧,是好是坏,是值得探讨的问题。1 目前分级医院的基本任务 一级医院的基本任务是完成社区的卫生防疫、计划生育、妇幼保健、健康教育、医疗服务以及社区范围卫生行政管理工作;二级医院的基本任务是向多个社区提供医疗、预防、保健康复服务     

系统性红斑狼疮脑梗死早期征兆及预后

目的：探讨狼疮性脑梗死的早期表现，以提高对狼疮性脑梗死的警惕性。方法：分析了5例SLE脑梗死的临床资料，在发生脑梗死前已有神经损害表现。结果：均给予糖皮质激素合环磷酰胺或环孢素A治疗，1例还应用东菱克栓酶进行溶栓，3例症状得到不同程度改善。结论：出现肢体无力，抽搐，精神障碍等新发症状应引起足够重视，警惕脑梗死的发生，短程大剂量激素冲击及CTX治疗，病情得到较好控制，溶栓治疗应用也取得了较好疗效。     

端粒酶活性的抑制对顺铂诱导HL—60细胞凋亡的影响

采用端粒酶聚合酶链反应-酶联免疫吸附测定(PCR ELISA)的方法,检测人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡脱氧核苷酸(ASODN)处理HL-60细胞前后端粒酶活性的改变,并进一步通过姬姆萨染色及流式细胞术方法,分析HL-60细胞的端粒酶活性受到抑制后顺铂对HL60细胞凋亡的影响.结果显示hTERT基因ASODN作用于HL60细胞后,端粒酶活性表现逐渐下降;hTERT ASODN与顺铂联合可诱导HL-60细胞出现一系列特征性的凋亡细胞的形态学变化;hTERT基因ASODN作用于HL-60细胞24小时再加入顺铂,用流式细胞术测定凋亡细胞的百分率明显高于正义寡核苷酸(S)DN)联合顺铂作用组和单用顺铂作用组(P＜0.01).然而,hTERT基因的ASODN下调HL-60细胞的端粒酶活性以后,再用DNR和Ara-c处理不能加速HL-60细胞的凋亡.以上的结果表明了端粒酶活性的下调可选择性促进顺铂诱导HL-60细胞凋亡.     

bcl—2反义寡核苷酸增强K562白血病细胞对As2O3药物敏感性

采用细胞培养法,免疫组化实验技术和流式细胞仪等项技术,研究了bcl-2基因反义核酸和砷剂单独及联合应用对K562细胞的生物效应,DNA及bcl-2蛋白的变化.结果显示,As2O3(2.0μmol/L)+bcl-2 ASODN(10.0μmol/L)联合作用比单用As2O3(2.0 μmo1/L)或bcl-2 ASODN(10.0μmol/L)显著增强诱导细胞凋亡的作用(P＜0.01);流式细胞仪检测显示,联合作用引起的bcl-2蛋白表达亦明显减少(P＜0.1).结论表明,bcl-2基因反义核酸能明显提高和显著增强K562白血病细胞对As2O3药物敏感性.